人工授精是用器械采取公畜的精液，再用器械把精液輸入到發(fā)情母畜生殖道內(nèi)，以代替公母畜自然交配的一種配種方法。人工授精不僅有效地改變家畜的交配過(guò)程，更重要的是提高了公畜配種效能。人工授精只用于健康的公母畜，可防止各種疾病，已成為現(xiàn)代畜牧業(yè)的重要技術(shù)之一。
一、牛的發(fā)情鑒定
母牛的發(fā)情周期平均為21天，正常母牛發(fā)情周期的間隔時(shí)間變化很小，牛的發(fā)情期一般為1.5～3.5天。母牛發(fā)情時(shí)興奮不安，吼叫，爬跨其他母牛，外陰部光滑腫脹、發(fā)紅，陰道粘膜濕潤(rùn)，分泌出清亮的粘液，產(chǎn)奶量下降，食欲減退，嗅其它母牛尾根。母牛發(fā)情時(shí)其卵泡開(kāi)始發(fā)育成熟最后排卵，是因?yàn)槁雅菔艿侥X垂體前葉分泌的促卵泡激素和促黃體素的刺激而實(shí)現(xiàn)。一般根據(jù)牛的外部表現(xiàn)來(lái)判斷母牛的發(fā)情，但為了確定排卵的具體時(shí)間，則必須作直腸檢查，觸摸卵巢、卵泡的發(fā)育情況。
    二、最適輸精時(shí)間
輸精時(shí)間一般因母牛的年齡、品種、胎次、營(yíng)養(yǎng)水平的不同而有所差異，一般母牛發(fā)情期中輸精最佳時(shí)間是發(fā)情開(kāi)始后12小時(shí)到發(fā)情終止或排卵前的12小時(shí)內(nèi)。

三、器械和藥物準(zhǔn)備：
1、藥業(yè)的配制75%酒精及75酒精棉球；1/3000新潔爾滅溶液；生理鹽水棉球。
2、器械30L液氮貯存罐；牛用輸精器；高壓滅菌器。
3、器械的洗滌人工受精用的器械在每次使用以后，用洗滌劑洗刷干凈，并需保持清潔、干凈。
四、冷凍精液貯存
1、在液氮貯存館內(nèi)貯存的冷凍精液，必須切實(shí)地浸沒(méi)于液氮中。
2、取放貯存冷凍精液的提筒只允許上提到液氮的管頸段之下，嚴(yán)禁提出罐外，在罐內(nèi)脫離液氮的時(shí)間不得超過(guò)10s。
3、在向另一
MVE液氮罐

內(nèi)轉(zhuǎn)移凍精液時(shí)，精液提筒不得脫離液氮5s。
4、取放冷凍精液之后，應(yīng)及時(shí)蓋上罐塞，以減少液氮消耗及防止異物落入罐內(nèi)。
5、嚴(yán)防不同品種、個(gè)體公畜的冷凍精液混雜，難以辨識(shí)。
6、對(duì)長(zhǎng)期用作貯存冷凍精液的液氮罐應(yīng)定期清理和洗刷。
五、解凍
解凍時(shí)把細(xì)管精液從液氮中取出，操作時(shí)間越短越好，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可影響其他未解凍精液的品質(zhì)。解凍時(shí)把細(xì)管浸入40℃左右的溫水中15秒左右，待管內(nèi)精液的顏色發(fā)生變化后即可取出，在解凍時(shí)不要讓精液升溫過(guò)高。細(xì)管精液取出后，先用紗布擦凈細(xì)管表面的水，握住手掌稍微揉一揉，最后將細(xì)管的封閉端剪掉，推進(jìn)輸精器里面，準(zhǔn)備輸精。
六、輸精時(shí)間
選擇最適宜的時(shí)間輸精，才能保證生活力強(qiáng)的精子和卵子在受精部位相遇，提高受胎率。輸精時(shí)間太早，精子喪失受精能力或死亡，不能使卵子受精;輸精時(shí)間太遲，即使精子受精能力強(qiáng)，卵子排出時(shí)間太久，卵子衰老了也不能受精。母牛排卵后的受精能力為20～24小時(shí)，精子在母牛生殖道中受精能力為28～50小時(shí)，一般母牛發(fā)情初期輸精受胎率低，發(fā)情后12小時(shí)或排卵前8小時(shí)輸精最為合適。
輸精方法
母牛需經(jīng)發(fā)情鑒定及健康檢查后才能給予輸精。接受輸精的母牛先要保定，牛一般站在輸精架內(nèi)輸精，沖洗牛的外陰部并消毒，輸精員的指甲要剪短磨光，洗滌擦干，并用75%酒精消毒。戴長(zhǎng)臂手套采取直腸把握法輸精時(shí)，先由左手掏出糞便，再伸入直腸，尋找并握住子宮頸，用胳膊壓開(kāi)陰門(mén)，右手持輸精導(dǎo)管插入陰門(mén)，先向上傾斜避開(kāi)尿道口，再轉(zhuǎn)入水平直向子宮頸口，借助進(jìn)入直腸內(nèi)的一只手固定和協(xié)同動(dòng)作，將精液輸入子宮內(nèi)或子宮頸5～6厘米處，最后輕輕地拉出輸精器。輸精母牛須做好記錄，各項(xiàng)記錄必須按時(shí)，準(zhǔn)確，并定期進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析

七、討論和小結(jié)
為了提高受胎率，必須掌握影響受胎率的因素。決定受胎率的主要因素有：種公牛精液品質(zhì)，母牛發(fā)情排卵機(jī)能，人工授精技術(shù)操作質(zhì)量，輸精時(shí)間等。

牛冷凍精液人工授精技術(shù)操作規(guī)程
1　范圍
    本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了人工授精站具備的條件、輸精器械的清洗消毒、凍精的運(yùn)輸保存、母牛的發(fā)情鑒定、母牛的輸精操作、母牛的妊娠檢查。
    本標(biāo)準(zhǔn)適用于全省各養(yǎng)牛場(chǎng)、戶母牛的冷凍精液人工授精技術(shù)操作。
    2　人工授精站具備的條件
    2.1 人工授精站應(yīng)建在交通方便、能繁母牛相對(duì)集中的地方。人工授精站的建立應(yīng)符合當(dāng)?shù)亓挤N牛推廣和改良規(guī)劃。
    2.2從事牛冷凍精液人工授精操作的人員須取得縣級(jí)畜牧行政主管部門(mén)頒發(fā)的上崗證。
    2.3人工授精站設(shè)置凍精貯存室和輸精操作室。
    2.3.1凍精貯存室安裝空氣消毒設(shè)備，室內(nèi)保持清潔干燥，窗明臺(tái)凈。
    2.3.2輸精操作室設(shè)在向陽(yáng)、干燥的地方，室內(nèi)安裝母牛保定架。
    2.4 人工授精站應(yīng)配備液氮生物容器、顯微鏡、卡蘇槍、鑷子、細(xì)管剪、溫度計(jì)等器械。
    3　輸精器械的清洗消毒
    3.1 各種器械用后先用肥皂水或2％的小蘇打水洗刷除污， 再用溫開(kāi)水沖洗干凈。
    3.2 玻璃、金屬器械、膠球(用紗布包好)和布類(lèi)用蒸汽滅菌三十分鐘或干熱滅菌。金屬和玻璃器械也可用75％的酒精擦拭和吸注消毒，并在酒精火焰上烘干。
    3.3輸精器用后及時(shí)清洗、消毒。每配種一頭母牛，須使用一支消毒過(guò)的卡蘇槍。塑料外套管只能使用一次。
    4　凍精的運(yùn)輸保存
    4.1凍精要貯存在裝有足夠液氮的生物貯存容器中，定期添加液氮。容器內(nèi)的凍精不得暴露在液氮面外。
    4.2在運(yùn)輸液氮、凍精時(shí)，應(yīng)使用生物運(yùn)輸容器。用車(chē)輛運(yùn)輸時(shí)，除利用原保護(hù)套外，應(yīng)另加木箱或其它保護(hù)裝置加以固定。
    4.3從容器內(nèi)取凍精時(shí)，只能將提筒置于容器頸下部，用長(zhǎng)柄鑷夾取凍精。如10秒鐘內(nèi)尚未取放完畢，應(yīng)將提筒放回液氮中浸泡一下再繼續(xù)提取。  
    4.4、貯存的凍精需向另一容器轉(zhuǎn)移時(shí)，凍精最好浸泡在液氮中進(jìn)行。凍精在空氣中暴露的時(shí)間不得超過(guò)5秒。
    5　母牛的發(fā)情鑒定
    5.1外部觀察法：母牛表現(xiàn)出興奮、站立不安、哞叫、食欲減退、頻尿、外陰部濕潤(rùn)、腫脹、流透明粘液等征狀，可判斷為發(fā)情。
    5.1.1 發(fā)情初期：母牛興奮不安，追爬其他母牛，但拒絕爬跨；****腫脹，粘液透明，不呈牽絲狀，粘性強(qiáng)。
    5.1.2 發(fā)情盛情：母牛溫順，接受爬跨，****腫脹。粘液透明，量多，呈牽絲狀，粘性強(qiáng)。
    5.1.3發(fā)情末期：母牛拒絕爬跨，****腫脹消退，粘液半透明、粘稠，粘性差，牽絲較短。
    5.2直腸檢查法：發(fā)情母牛子宮頸稍大、較軟，子宮角體積增大，子宮收縮反應(yīng)明顯。
    5.2.1發(fā)情初期：卵泡直徑0.5厘米左右，觸診時(shí)為一軟化點(diǎn)。5.2.2發(fā)情盛期：卵泡增大到1～1.5厘米，呈圓形，明顯突出于卵巢表面，波動(dòng)明顯。
    5.2.3發(fā)情末期：卵泡不再增大，泡壁變薄，緊張度增加，有一觸即破之感。
    6　母牛的輸精操作
    6.1凍精的準(zhǔn)備
    6.1.1凍精應(yīng)來(lái)自于取得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)許可證》的凍精生產(chǎn)站。
    6.1.2發(fā)情母牛的每次輸精量為細(xì)管凍精一支，凍精解凍后的精子活力不低于0.3。
    6.1.3用38土2℃溫水直接浸泡30秒鐘解凍細(xì)管凍精。將解凍的細(xì)管剪去頂部封口后插入卡輸槍?zhuān)咨纤芰贤馓坠軅溆谩?br />     6.2母牛的輸精時(shí)間
    6.2.1母牛的適宜輸精時(shí)間在發(fā)情末期。
    6.2.2發(fā)情母牛一個(gè)情期輸精兩次的，其間隔時(shí)間為8～12小時(shí)。
    6.3輸精母牛的準(zhǔn)備
    6.3.1將輸精母牛固定在保定架內(nèi)，用細(xì)繩拴好尾巴拉向一側(cè)固定。
輸精人員將手指甲剪短、磨光，戴上長(zhǎng)臂手套。對(duì)輸精母牛肛門(mén)及外陰進(jìn)行消毒后擦干。?    6.3.2
6.4輸精方法：輸精人員將一只手伸入母牛直腸內(nèi)，尋找并握住子宮頸的外口端，手臂往下按壓使陰門(mén)裂開(kāi)，另一只手把準(zhǔn)備好的卡輸槍自陰門(mén)向斜上方插入5～10厘米(避開(kāi)尿道口)，再改為平插，把卡輸槍送到子宮頸外口，然后兩手互相配合，使卡輸槍緩緩越過(guò)子宮頸管中的皺壁輪，將精液注入子宮頸內(nèi)。
 7　母牛的妊娠檢查
     7.1外部觀察法
     7.1.1母牛配種后二、三個(gè)情期仍未出現(xiàn)發(fā)情者，可初步認(rèn)為妊娠。
    7.1.2母牛妊娠三個(gè)月后，性情變得溫順，食欲增加，被毛出現(xiàn)光澤。妊娠五、六個(gè)月后，腹圍增大，右側(cè)腹壁突出，可在腹壁觸到或看到胎動(dòng)。
7.2直腸檢查法
7.2.1母牛妊娠一個(gè)月，兩側(cè)子宮角不對(duì)稱(chēng)，角間溝清楚。孕角較空角稍大變粗、柔軟，有液體波動(dòng)感，彎曲度變小。孕側(cè)卵巢較大，有黃體突出于表面。子宮中動(dòng)脈如麥稈粗。
    7.2.2母牛妊娠二個(gè)月，孕角比空角粗約兩倍。角間溝平坦。孕角薄軟，波動(dòng)明顯。孕側(cè)卵巢較大，有黃體。孕側(cè)子宮中動(dòng)脈增粗一倍。
    7.2.3母牛妊娠三個(gè)月，孕角大如耍兒頭，波動(dòng)感明顯，空角比平時(shí)增粗一倍，子宮開(kāi)始沉入腹腔，角間溝已摸不清楚。孕側(cè)子宮中動(dòng)脈增粗2至3倍，有時(shí)可摸到特異博動(dòng)
  。MVE液氮罐

牛塑料細(xì)管冷凍精液
人工授精技術(shù)操作規(guī)程
   家畜冷凍精液人工授精是近代畜牧科學(xué)的一項(xiàng)新技術(shù)，新疆維吾爾自治區(qū)近幾年的黃牛改良工作實(shí)踐證明它可以不受時(shí)間、地點(diǎn)的限制，可擴(kuò)大最優(yōu)秀種公牛的配種利用效率，有力地加快家畜配種改良的進(jìn)程，它比常規(guī)人工授精具有更高的操作要求和科學(xué)性，為加強(qiáng)廣大基層操作人員的責(zé)任心，進(jìn)一步提高細(xì)管凍精配種的技術(shù)水平，使細(xì)管凍精人工授精技術(shù)操作規(guī)范化，保證冷凍精液授精的受胎效果，特制定本操作規(guī)程。
    1、 液氮罐人工授精人員
   （1）人工授精人員必須具有家畜繁殖基礎(chǔ)理論知識(shí)，熟練掌握細(xì)管凍精人工授精的各個(gè)主要技術(shù)環(huán)節(jié)。例如：細(xì)管冷凍精液的保存、運(yùn)輸、解凍，精液品質(zhì)鑒定、貯氮、貯精容器的使用，母畜生殖器管的解剖生理，發(fā)情鑒定、直腸把握子宮頸輸精及妊娠診斷等技術(shù)，必須了解、掌握，并熟練應(yīng)用于實(shí)際中，掌握基本的消毒滅菌的方法，控制預(yù)防和治療母畜生殖器官傳染病及母畜產(chǎn)科疾病的知識(shí)。
   （2）人工授精人員要刻苦鉆研業(yè)務(wù)技術(shù)，經(jīng)縣以上主管部門(mén)考核合格，發(fā)給合格證書(shū)方能從事細(xì)管凍精人工授精業(yè)務(wù)，主管部門(mén)應(yīng)按其技術(shù)高低分別授予不同的技術(shù)職稱(chēng)，對(duì)工作成績(jī)低劣，責(zé)任心不強(qiáng)，長(zhǎng)期不能完成冷配受胎任務(wù)者，應(yīng)停止輸精業(yè)務(wù)，進(jìn)一步進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)。人工授精員要相對(duì)穩(wěn)定于一定區(qū)域或崗位，以利熟悉情況和鞏固結(jié)果。
   （3）人工授精站點(diǎn)及人工授精員設(shè)置應(yīng)有規(guī)劃，各地州縣可根據(jù)自己的具體情況安排實(shí)施，原則上單罐年配種量應(yīng)達(dá)250頭以上，單罐輸精配種頭數(shù)愈多，愈有利于降低配種成本。
    2、細(xì)管冷凍精液的劑型及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
目前，新疆維吾爾自治區(qū)可供采用的牛凍精劑型主要由兩種：即顆粒凍精、細(xì)管凍精，目前主要以細(xì)管凍精為主。
   （1）顆粒凍精必須達(dá)到下列標(biāo)準(zhǔn)：劑量每顆粒0.1亳升±0.01；解凍活力不低于0.35（即35%前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子）；解凍后精子畸形率20%，頂體完整率40%以上；衛(wèi)生指標(biāo)：無(wú)國(guó)標(biāo)GB4143-84規(guī)定的各種傳染性疫病；每毫升細(xì)菌菌落數(shù)不得高于1000個(gè)，解凍后的精液中無(wú)病源性微生物。
   （2）塑料細(xì)管凍精：劑量主要以0.25ML為主，每劑有效精子數(shù)不低于1000萬(wàn)個(gè)，其它與顆粒凍精相同。
細(xì)管精液每個(gè)劑量上的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)清晰，包裝完整、準(zhǔn)確、細(xì)管封口嚴(yán)密、無(wú)裂痕。
    3、運(yùn)輸
   （1）購(gòu)買(mǎi)凍精運(yùn)輸人員一定要了解凍精的基本原理，挑選責(zé)任心強(qiáng)，工作細(xì)致，具有凍精檢查能力者承擔(dān)，運(yùn)輸前要檢查容器的質(zhì)量，看是否安全適用，并定時(shí)檢查液氮的消耗情況，及時(shí)添加液氮，運(yùn)輸前后一定要保證細(xì)管凍精完全浸泡在液氮中，如發(fā)現(xiàn)液氮消耗過(guò)多或罐的外殼有水珠或掛霜，說(shuō)明罐的保冷性能有問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)更換。
   （2）對(duì)液氮罐要細(xì)心愛(ài)護(hù)，搬運(yùn)時(shí)要握住手柄，抬起罐體不得拖行、躺放、倒置、疊放，裝好液氮的罐子，要及時(shí)罩上皮套、棉套或裝入紙盒或木箱，嚴(yán)防撞擊或翻倒。盛有精液的液氮罐嚴(yán)禁在陽(yáng)光下直曬。
   （3）凍精運(yùn)輸前后應(yīng)辦好交接手續(xù)，填寫(xiě)卡片、簽名、精液要抽樣檢查，達(dá)不到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)拒絕接受（簽名），亦不得發(fā)放用于輸精。
    4、保存
   （1）液氮罐要專(zhuān)人負(fù)責(zé)保存，使用和保養(yǎng)，放置在室內(nèi)干燥、通風(fēng)和安全處，罐下應(yīng)墊以木板，離地面二十至三十厘米高，室內(nèi)不準(zhǔn)吸煙，不住人。
   （2）為便于分發(fā)和使用凍精，罐口外面必須拴系有標(biāo)簽，標(biāo)記品種名稱(chēng)、種公牛號(hào)，罐內(nèi)凍精標(biāo)記有凍精制作時(shí)間，解凍活力制作單位，細(xì)管（或顆粒）數(shù)量，品種代碼及種公牛號(hào)等，新疆維吾爾自治區(qū)畜禽繁育改良總站生產(chǎn)的細(xì)管凍精印字標(biāo)記，順序?yàn)槿铡⒃隆⒛?mdash;站名—品種代碼—牛號(hào)，例如[05、11、2000、自治區(qū)改良站、XM、2415]或年、月、日—站名—品種代碼—牛號(hào)。
   （3） 取放細(xì)管凍精時(shí)，一定做到動(dòng)作穩(wěn)、準(zhǔn)、快，在室溫下，凍精由一個(gè)液氮容器轉(zhuǎn)移到另一個(gè)液氮容器時(shí)，操作時(shí)間不得超過(guò)5秒鐘。單個(gè)取用時(shí)不宜將整個(gè)精液袋提至液氮頸口上，暴露在空氣中，精液取用或轉(zhuǎn)移完畢后，立即加上蓋塞。如果分取的精液數(shù)量較多，必須準(zhǔn)備另一個(gè)盛有液氮的廣口容器，在盛有液氮的容器中進(jìn)行分裝或計(jì)數(shù)。
   （4）貯精罐要每隔5—7天檢查稱(chēng)重一次，保管精液的人員要了解每個(gè)罐液氮消耗情況。一般我們要了解液氮罐的消耗情況可依據(jù)公式得出結(jié)果：總重量減去液氮罐重即得液氮重（公斤數(shù)），除以系數(shù)0.808即可得知罐內(nèi)液氮公升數(shù)。當(dāng)罐內(nèi)液氮容量低于全容量的三分之一時(shí)，需及時(shí)補(bǔ)充添加液氮以防精液報(bào)廢。
   （5）凍精貯存器至少每年或每個(gè)配種期結(jié)束時(shí)要徹底清洗一次。清洗時(shí)將罐內(nèi)存留的液氮全部倒凈，取出殘留在罐底的細(xì)管凍精（顆粒凍精棄之），經(jīng)過(guò)兩天左右待容器內(nèi)的溫度上升至室溫，以40℃—50℃的溫水或中性洗滌劑，用細(xì)軟的紗布擦洗干凈，并敞口涼干內(nèi)部。有條件的地方可用40℃—50℃熱空氣吹干封閉，保存?zhèn)溆谩?br />    5、藥械準(zhǔn)備
  （1）各改良點(diǎn)或人工授精配種網(wǎng)點(diǎn)，要備齊各種人工授精必用的器械和藥品，細(xì)管凍精不需要解凍液，但需準(zhǔn)備有檢查活力的蓋玻片與載片、保溫箱、卡蘇輸精器、細(xì)管剪刀等常用設(shè)施。
   （2）器械消毒準(zhǔn)備，器械在使用前必須檢查有無(wú)破損或失靈，輸精器及配種所需的外套、細(xì)管剪刀等無(wú)菌保存所用的毛巾等用洗衣粉溫水洗凈，然后用清水洗干凈，再用蒸溜水沖洗兩遍，瀝干水分。
   （3）藥液配制，配制各種藥液和解凍液前，應(yīng)先調(diào)整好天平，使藥品稱(chēng)量準(zhǔn)確，溶液中所用的蒸餾水體積要量度準(zhǔn)確，顆粒凍精解凍常用的2.9%檸檬酸鈉液一般現(xiàn)用現(xiàn)配，亦可制成安瓿，保存在0℃—5℃的冰箱中，隨時(shí)取用。
    6、細(xì)管凍精解凍
   （1）首先將38℃—40℃的溫水倒入敞口鋁式飯盒中，調(diào)試好溫度，并從液氮中迅速取出細(xì)管凍精投入水中快速擺動(dòng)10—15秒鐘，取出后用干凈紗布擦去水珠，并放入手掌中快速搓動(dòng)數(shù)下使細(xì)管中的精液混勻，為使精液在解凍后可以保存較長(zhǎng)時(shí)間，以及為了防止輸精時(shí)室溫過(guò)低對(duì)已經(jīng)升溫的精液產(chǎn)生不良影響，在解凍時(shí)不要讓精液升溫過(guò)高。冷凍精液一般要求輸精前幾分鐘，最多不超過(guò)15分鐘前解凍，并立即使用。必要時(shí)也可體溫化解，也可35℃水浴30秒解凍，裝槍前必須借助手溫快速搓動(dòng)，使溫度回升精液復(fù)蘇再輸精，此解凍方法配種技術(shù)熟練的人員可嘗試，目前不積極提倡。
   （2）解凍后的細(xì)管凍精用凈衛(wèi)生紙或消毒棉紗擦干，用細(xì)管專(zhuān)用剪刀平直橫剪封口前端1.2—1.5CM后棉塞端裝入輸精槍準(zhǔn)備輸精。
   （3）細(xì)管凍精也可采用35℃水溫30秒鐘解凍，此方法可延長(zhǎng)精子存活時(shí)間，冷配技術(shù)熟練人員可嘗試。
   （4）細(xì)管凍精在解凍后應(yīng)檢查精子活力，標(biāo)準(zhǔn)鏡檢溫度37℃—38℃，活力檢查需在解凍后3—5分鐘精子完全復(fù)蘇時(shí)進(jìn)行，解凍活力不足0.35不得用以輸精，活力評(píng)定應(yīng)取多視野，多液層平均值，解凍精液宜在解凍后立即使用，最多不超過(guò)15分鐘。
   （5）基層各配種站點(diǎn)一定要規(guī)范試驗(yàn)室操作方法，配齊簡(jiǎn)易檢測(cè)設(shè)備，如：保溫箱、載片、蓋片、細(xì)管剪刀等，而且一定要強(qiáng)調(diào)檢查活力的試驗(yàn)室室溫不能低于15℃，保溫箱溫度不能低于37℃，從而抑制精子活力的復(fù)蘇。同時(shí)，所有檢查精子活力的器械設(shè)備一定要保持清潔干凈，避免人為的因素造成檢查精子活力偏低的種種問(wèn)題出現(xiàn)。
    7、輸精
   （1）母牛發(fā)情鑒定：“以直腸檢查為主，結(jié)合觀察詢問(wèn)、檢查紀(jì)錄等綜合判斷”為準(zhǔn)繩的原則進(jìn)行人工授精。輸精適宜時(shí)間應(yīng)在發(fā)情末期，即排卵前0—12小時(shí)，最好在排卵前6小時(shí)，排卵后立即追配一般效果稍差。
   （2）輸精方法應(yīng)采用直腸把握子宮頸深部輸精法。輸精動(dòng)作要柔和、快捷，做到“輕插、適深、緩注、慢出”。輸精劑量必須準(zhǔn)確，防止夾吸母牛努責(zé)（努責(zé)時(shí)可將母牛稽甲部捏抓幾下）殘留精液過(guò)多或嚴(yán)重努責(zé)時(shí)應(yīng)補(bǔ)輸一劑。冬季氣溫低寒時(shí)應(yīng)防止精液受冷打擊，輸精槍?xiě)?yīng)用消毒毛巾包裹為佳。
   （3）輸精人員必須有嚴(yán)格無(wú)菌操作觀念，輸精前結(jié)合直檢卵泡發(fā)育，掏盡糞便。輸精前應(yīng)用千分之一的高錳酸鉀水清洗母牛后軀，重點(diǎn)為肛門(mén)、會(huì)陰、尾根，擦干后用消毒生理鹽水棉球擦凈外陰部及陰門(mén)裂內(nèi)部，不得有糞便污染。輸精器必須在無(wú)污染的情況下直接插入陰道，隨后再用另一只手插入直腸，把握子宮頸，每輸精一次必須更換一支輸精器外套。（嚴(yán)格講外套只需使用一次，但根據(jù)我區(qū)實(shí)際，輸精器外套可重復(fù)使用數(shù)次，但應(yīng)嚴(yán)格消毒）
    （4）輸精后，應(yīng)檢查殘留量及未滴的精子活力，如劑量不足，活力明顯下降，應(yīng)檢查原因，并作補(bǔ)輸。
     8、記錄統(tǒng)計(jì)及報(bào)表
     （1）母牛繁殖記錄表，每頭母牛登記一張，配種時(shí)認(rèn)真逐項(xiàng)填寫(xiě)，并長(zhǎng)期保存，并將冷配產(chǎn)犢公、母性別登記準(zhǔn)確，按時(shí)統(tǒng)計(jì)上報(bào)。
     （2）評(píng)定細(xì)管凍精配種效果，主要以第一情期受胎率的高低為標(biāo)準(zhǔn)，一般我們也以平均情期受胎率為標(biāo)準(zhǔn)。MVE液氮罐